Chov lariev včely medonosnej v laboratórnych podmienkach

Chov lariev včely medonosnej v laboratórnych podmienkach

Rok:
2017

Celkové hodnotenie

Vedecká práca
100%
Prevedenie (dizajn)
100%
Diskusná interakcia
100%
PoužívateľVedecká prácaDizajnDiskusná interakcia
Mgr. Júlia Hunková100%100%100%
Mgr. Júlia Jarošová100%100%-
Bc. Zuzana Eliašová100%100%-
MVDr. Denisa Toropilová PhD.100%100%-
Mgr. Dana Szabóová100%100%-
RNDr. Miroslav Horváth PhD.100%100%100%
Ing. Štefan Belický100%100%100%
Mgr. Lucia Kindernay PhD.100%100%100%
Mgr. Jana Juhásová100%100%100%
ISBN: 978-80-972360-1-4

Chov lariev včely medonosnej v laboratórnych podmienkach

Maroš Laho1 , Mária Šedivá , Jaroslav Klaudiny
1 Chemický ústav SAV, Bratislava, Slovenská republika
chemlaho@savba.sk

Umelý chov včelích lariev je významným metodickým nástrojom v apidologickom výskume. Ide o in vivo metódu založenú na in vitro systéme. Slúži najmä k tomu aby sa za kontrolovaných a reprodukovateľných podmienok mohol študovať vplyv rôznych faktorov na včelie larvy1. Má veľký význam aj pri testoch toxicity rôznych produktov pre ochranu rastlín2,3,4. Je pomerne náročný a už viac ako pol storočia sú vyvíjané chovné postupy, pri ktorých ako kŕmna diéta slúžia rôzne zmesi materskej kašičky (MK), glukózy, fruktózy, kvasničného autolyzátu (YE) v destilovanej vode1,5,6,7,8. Významným faktorom pre úspech chovu je kvalita použitej MK, ktorá je zdrojom látok esenciálnych pre správny vývin lariev. Je dôležité aby MK nebola kontaminovaná antibiotikami, ktoré sa v niektorých krajinách používajú v boji voči včelím patogénom. Takáto kontaminácia môže ovplyvňovať životaschopnosť lariev a v prípade experimentálnej infekcie umelo znižovať ich infikovateľnosť skúmanými patogénmi.

Cieľom práce bolo testovanie in vitro chovu lariev slovenskej kraňskej včely (Apis mellifera carnica), ktorý chceme využiť pri skúmaní účinkov antimikrobiálnych látok voči včelím larválnym patogénom. S týmto cieľom súvisela aj analýza kvality komerčnej čínskej MK (Sichuan, Čína), ktorú sme použili ako hlavnú zložku larválnej diéty – stanovenie jej pravosti a antimikrobiálnych vlastností.

Pomocou tricínovej SDS PAGE9 sme analyzovali proteínové profily čínskej MK a MK získaných z včelstiev na Slovensku a zistili ich vysokú podobnosť. S využitím agarového difúzneho testu sme stanovili antimikrobiálne aktivity lipidových a proteínových extraktov uvedených testovaných MK. Všetky extrakty MK vykazovali antimikrobiálne aktivity, pričom slovenské MK mali aktivity podobné, alebo vyššie ako čínska MK, čo je bežné pre európske MK10,11. V in vitro chove sme použili 58 včelích lariev vo veku ~ 12 hodín. Larvy sme chovali v Petriho miskách na kŕmnej diéte pozostávajúcej z 53% čínskej MK, 4% glukózy, 8% fruktózy, 1% YE a 34% destilovanej vody8. Dosiahli sme mieru larválneho prežívania 86,2% (50 z 58 lariev) a po čase prislúchajúcom štádiu kukly sme získali 53,4% dospelých jedincov (31).

Porovnávacie analýzy komerčnej čínskej MK a MK zo slovenských včelstiev poukazujú na to, že komerčná MK je pravá (nefalšovaná) a má antimikrobiálnu aktivitu porovnateľnú s aktivitami domácich MK. Usudzujme preto, že nie je kontaminovaná antibiotikami. V umelom chove včelích lariev, pri ktorom bola použitá uvedená komerčná MK, sme následne dokázali vychovať dospelých včelích jedincov. V ďalšej práci bude pre potreby nášho výskumu nutné optimalizovať niektoré parametre chovu aby sme získali vyššie percento dospelých jedincov, ako aj stanoviť dávky patogénov schopné vyvolať u lariev infekciu.

Poďakovanie: 

Práca vznikla za finančnej podpory grantu VEGA 2/0175/15.

Zdroje: 

[1] Crailsheim, K. a kol. J. Apicult. Res. 2013, 52(1), 1–16.
[2] Davis, A.R. a kol. J. Apicult. Res. 1988, 27, 146-161.
[3] Aupinel, P. a kol. Julius-Kühn-Archiv 2009, 423, 96-102.
[4] Mullin, C.A. a kol. PLoS ONE 2010, 5, e9754.
[5] Weaver, N. Bee World 1955, 36(9), 157-159.
[6] Rembold, H. a Lackner, B. J. Apicult. Res. 1981, 20, 165-171.
[7] Aupinel, P. a kol. Bull. Insectology 2005, 58, 107-111.
[8] Kaftanoglu, O. a kol. J. Insect Sci. 2011, 11, 96.
[9] Schägger, H. a von Jagow, G. Anal. Biochem. 1987, 166, 368-379.
[10] Sabatini, A.G. a kol. J. ApiProd. ApiMed. Sci. 2009, 1, 1-6.
[11] Ferioli, F. a kol. J. Sep. Sci.  2007, 30, 1061 – 1069.

Diskusia

Ahoj Maroš, super práca, aj vysoko aktuálna. Dúfam, že sa ti darí.

Ahoj Julka, ďakujem za tvoje hodnotenie. Áno táto tematika je dnes vysoko aktuálna. Nejde však vôbec o ľahkú záležitosť, napr. včelia matka (kráľovná) je počas svojho larválneho štádia kŕm...mená 1500-1700x, robotnica síce niekoľko násobne menej (okrem toho sú neustále kontrolované dospelými včelami)avšak laboratórne je nemožné niečo podobné simulovať. Navyše celkový vývin včelej robotnice (pozn. na ne je zameraný umelý chov, keďže vo včelstve tvoria majoritu) trvá od položenia vajíčka 21 dní (+ pri nepriaznivejších podmienkach, čím je iste aj umelý chov, sa to môže ešte o deň dva predĺžiť), z čoho plynie časová náročnosť prevedenia experimentov. Tie musia zároveň rešpektovať životný (sezónny) cyklus včelstiev, z ktorých sú larvy odoberané. Takže experimenty prebiehajú od mája do augusta. Ďakujem za prianie, azda sa bude dariť, podobne tak želám i tebe. Keď by ťa zaujímali náhodou nejaké detaily a pod. rád na všetko odpoviem. Prajem ešte pekný deň :-)

Dobrý deň, pekná práca, potešili ma Vaše odborné zistenia, čo sa týka profilu našej včely v porovnaní s čínskou včelou, a schopnosť i náročnosť zosúladiť biologický cyklus s laboratórnymi podmienkami. V práci spomínate, že mienite do budúcna tieto in vitro chované včely použiť na stanovenie voči včelím patogénom, ktorými patogénmi sa budete zaoberať? Ďakujem vopred za odpoveď a prajem príjemný deň.