Elektrochemiluminiscencia v stanovení protilátok SARS-CoV-2

Elektrochemiluminiscencia v stanovení protilátok SARS-CoV-2

Celkové hodnotenie

Vedecká práca
100%
Prevedenie (dizajn)
100%
Diskusná interakcia
100%
PoužívateľVedecká prácaDizajnDiskusná interakcia
RNDr. Timotej Jankech100%100%100%
Mgr. Ivana Gerhardtová100%100%100%
MUDr. Terézia Sedlačková100%100%100%
RNDr. et Mgr. Nicholas Martinka ,PhD.100%100%100%
ISBN: 978-80-972360-6-9

Elektrochemiluminiscencia v stanovení protilátok SARS-CoV-2

Nicholas Martinka1,2 , Timotej Jankech 3 ,
1 Oddelenie klinickej biochémie, Nemocnica Alexandra Wintera, Winterova 66, 921 01 Piešťany, Slovensko
2 Fakulta zdravotníctva a sociálnej práce, Trnavská Univerzita v Trnave, Hornopotočná 23, 918 43 Trnava, Slovensko
3 NT-LAB o.z., Teplická 35, 921 01 Piešťany, Slovensko
nicholas.martinka@gmail.com

Výskytom nového koronavírusu – SARS-CoV-2, v Európskej populácií nastáva aj problém laboratórnej diagnostiky, monitorovania protilátok proti vírusu SARS-CoV-2. Dostupné sú viaceré varianty testov, od rýchlych testov rôznych výrobcov, ktoré detegujú protilátky IgG a IgM, až po automatizované testy na princípoch ELISA a ECLIA. Veľkou výhodou predstavuje využitie elektrochemiluminiscencie na automatizovaných analyzátoroch cobas Roche. Test Anti-SARS-CoV-2  predstavuje imunotest na kvalitatívnu detekciu protilátok v in vitro systéme. Tento test  je vyvinutý ako total test, kde sú detegované protilátky IgG a IgM spolu ako jeden výsledok, kde je použitý rekombinantný proteín predstavujúci nukleokapsidový (N) antigén na stanovenie protilátok SARS-CoV-2. Produkcia protilátok IgM a IgG je veľmi variabilná, sú dostupné viaceré dynamické grafy, ktoré popisujú tvorbu protilátok v čase. Prítomnosť protilátok IgM bola pozorovaná už 5. deň po nástupe príznakov, pre IgG je to 5-7 dní od nástupu príznakov ochorenia. Maximálna produkcia protilátok je zatiaľ definovaná v 2.-3. týždni pre IgM a 3.-6. týždni pre IgG. Z dostupných údajov je zrejmé, že IgM vymizne približne v 6.-7. týždni, pričom pri IgG je pozorovaná vysoká hodnota protilátok v tomto čase. V súčasnej dobe je tento spôsob detekcie veľmi vhodný, nakoľko nie sú dostupné štúdie, ktoré by presne definovali infekčnosť pacienta podľa jednotlivých tried protilátok. Z jednotlivých tried protilátok by sa teoreticky dal odvodiť priebeh ochorenia, v prípade veľkej variability tvorby protilátok je tento odhad nemožný. ECLIA v detekcií protilátok SARS-CoV-2 má množstvo výhod, medzi hlavné výhody patria celkový čas analýzy vzorky (18 minút), dobrá stabilita kalibrácií a robustnosť celého systému. Princípom stanovenia anti-SARS-CoV-2 je použitie biotinylovaných špecifických rekombinatných antigénov namierených pre SARS-CoV-2, ktoré sú značené ruténiom, kde je vytvorený sendvičový komplex. Vytvorený komplex sa následne viaže na potiahnuté častice streptavidínom, kde sa vytvorí pevný komplex interakciou biotínu a streptavidínu. Po inkubácií a odstavení interferentov sa zmeria chemiluminiscenčná emisia, ktorá sa meria pomocou fotonásobiča.

Poďakovanie: 
Zdroje: 

Diskusia

Pozdravujem pan Martinka, dakujeme za vas prispevok. Aktualne sa v mediach objavuje sprava o vysokych , dokonca az sto percentnych presnostiach testov na protilatky, spolocnosti, ktorej testy prezentujete. Jedna sa o totozny produkt? Pisete, ze v maji budu dostupne tieto produkty na trhu. Pytam sa nakolko obdobne testy doposial neboli az tak vyuzivane vzhladom na ich potencialne falosne negativne vysledky. Zvysenu presnost prezentujucich produktov zabezpecuje sucasna detekcia IgG a IgM ? V akom casovom rozpati od nastupu ochorenia sa ukazuju testy najucinnejsie? Pripadne po akej dlhej dobe sa daju spolahlivo urcit protilatky v tele po ochoreni? Dakujem a drzim palce v dalsom napredovani vyskumu!