Vibrio natriegens je Gram negatívna morská baktéria s najrýchlejším doteraz známym rastom spomedzi ostatných mikroorganizmov. Z tohto dôvodu by v budúcnosti mala byť vhodným hostiteľom pre heterologickú produkciu rekombinantných proteínov v molekulárnej biológií a biotechnológií. V tejto práci prezentujeme konštrukt, so signálnym peptidom pre levansacharázu, ktorý by mal podporiť sekréciu rekombinantných proteínov do periplazmatického priestoru.
Dalsi osud konstruktov ?
Dobry den, zaujimal by ma dalsi osud vami pripravenych konstruktov: do plazmidu pJK100EK-hGH vloženy signálny peptid pre levansacharázu a konstrukt pJK100EK-hGH s vymenenou antibiotickou rezistenciou (Amp za Cm). Postupia oba do dalsich faz testovania, napr. v inych projektoch? Resp. planujete pripravit este dalsie ine taketo konstrukty, ake? Vopred dakujem za odpovede, ZB
Re: Dalsi osud konstruktov ?
Dobry den prajem. Po vymeneni ATB rezistencie sme vlozili signalny peptid do oboch konstruktov, aj do povodneho s Amp rezistenciou aj do noveho s Cm rezistenciou. Nasledne sme produkovali ludsky rastovy hormon v E. coli kmenoch a vo V. natriegens a sledovali, ci sa protein produkuje do periplazmy a s akou efektivitou. Pri E. coli kmenoch sme boli uspesni, avsak sekrecia do periplazmy prebehla s malou efektivitou a signalny peptid sa neodstiepil, vo V. natriegens sme nemali uspesnu expresiu. Dalej sa bude pokracovat optimalizaciou celych konstruktov ako aj optimalizaciou podmienok expresie. Pekny den prajem. S pozdravom A.B.