Analýza transkripčného faktora MEF2C v ľudských srdcových fibroblastoch po atorvastatínovej intervencii in vitro

Analýza transkripčného faktora MEF2C v ľudských srdcových fibroblastoch po atorvastatínovej intervencii in vitro

Overall rating

Scientific work
97%
Design
97%
Discussion interaction
96%
UserScientific workDesignDiscussion interaction
Mgr. Patrícia Krivosudská100%100%100%
PharmDr. Kamila Chomaničová100%100%100%
PharmDr. Mária Pecháčová100%100%-
MDDr. Matúš Adamička100%100%100%
Ing. Zuzana Brnoliaková PhD.80%80%80%
Bc. Daniela Máčalová100%100%100%
ISBN: ISBN 978-80-972360-7-6

Analýza transkripčného faktora MEF2C v ľudských srdcových fibroblastoch po atorvastatínovej intervencii in vitro

Nikola Chomaničová1 , Simona Valašková , Adriana Adamičková2 , Andrea Gažová3 , Nikoleta Hulajová4 , Ján Kyselovič ,
1 Katedra farmakológie a toxikológie, Farmaceutická fakulta UK, Bratislava, Slovensko
2 Jednotka klinického výskumu, V. interná klinika, Lekárska fakulta UK a UNB Bratislava, Slovensko
3 Ústav farmakológie a klinickej farmakológie, Lekárska fakulta UK, Bratislava, Slovensko
4 IV. Interná klinika, Lekárska fakulta UK, Bratislava, Slovensko
nikola.chomanicova@fpharm.uniba.sk

Choroby srdca sú naďalej jednou z hlavných príčin úmrtí na celom svete, a to aj napriek zlepšeniu farmakoterapie, ktorá však nepôsobí kauzálne, ale len symptomaticky. Nakoľko kardiomyocyty majú obmedzenú regeneračnú schopnosť, ochorenia, ako napr. akútny infarkt myokardu, sa hoja tvorbou jaziev, a nie obnovou tkaniva do pôvodnej kvality. Nedostatok prietoku krvi do myokardu vedie k nekróze tkaniva, aktivujú sa srdcové fibroblasty a vyvíja sa fibróza. Keďže progresívne zvýšenie fibrózy môže viesť k systolickej dysfunkcii a hypertrofii ľavej komory, veľa pozornosti sa sústreďuje najmä na správanie sa aktivovaných srdcových fibroblastov, tzv. myofibroblastov. Myofibroblasty exprimujú aktín hladkého svalstva (α-SMA) a majú proliferatívne, migračné a sekrečné vlastnosti. Predpokladá sa, že liečivá používané aj na prevenciu kardiovaskulárnych ochorení - inhibítory HMG-CoA reduktázy - statíny, znižujú transformáciu srdcových fibroblastov na myofibroblasty, a to cez molekulárne dráhy späté s Rho-asociovanými kinázami (ROCK), ako aj transkripčnými faktormi GATA-4 a MEF2C.

V našej práci sme sa zamerali na objasnenie účinkov inhibítora HMG-CoA reduktázy, atorvastatínu, na ľudské srdcové fibroblasty 5.pasáže in vitro. Cieľom bolo preskúmanie intervencie atorvastatínu do molekulárnych mechanizmov srdcovej fibrózy sledovaním zmien expresie transkripčného faktora MEF2C. Srdcové fibroblasty boli ovplyvňované atorvastatínom (10 µM) po dobu 24 h, 48 h a 72 h, pričom boli využité metódy imunofluorescenčného farbenia buniek, RT-qPCR a Western blot.

Naše výsledky preukázali signifikantnú redukciu (p<0,05) transkripčného faktora MEF2C po vplyve atorvastatínu, a to na proteínovej aj mRNA úrovni, s najvýraznejším efektom po 48 h. Na základe toho predpokladáme, že atorvastatín by mohol mať potenciál v ovplyvnení signálnych dráh zapojených do procesu srdcovej fibrózy, pričom sú potrebné ďalšie podrobné analýzy na bližšie objasnenie týchto molekulárnych mechanizmov.

Thanks: 

Táto práca vznikla s podporou APVV-18-0103 a APVV-14-0416.

Sources: 

Discussion

Dobry den, dakujem za pripsewvok, blahozelam k vysledkom. Vedecka praca je casovo narocna, je to beh na dlhe trate, a mnohokrat sa "dopracujeme" k dalsim a dalsim otazkam... Mohli by ste specifikovat ake bude vase dalsie epxerimentalne hodnotenie Atorvastatínu (10 µM) na ľudskych srdcovych fibroblastoch v in vitro podmienkach? Vopred dakujem za odpoved, ZB

Dobrý deň, ďakujem pekne za otázku.
Ďalšie hodnotenie efektu atorvastatínu na ľudských srdcových fibroblastoch in vitro zahŕňa aj transkripčný faktor GATA-4 spomenutý v úvode abstraktu tohto príspevku. Ten je rovnako ako faktor MEF2C zapojený do signálnej dráhy ovplyvňujúcej srdcovú hypertrofiu a fibrotické zjazvenie myokardu po jeho poškodení. Mimo uvedeného sa však zameriavame v rámci kardiovaskulárnych ochorení aj na iné molekulárne mechanizmy, ktoré by atorvastatín pleiotropnými účinkami mohol ovplyvniť. Jedná sa napr. o signálnu kaskádu PI3K/Akt a s ňou späté rastové faktory, ako napr. vaskulárny endotelový rastový faktor (VEGF-A) spojený s neoangiogenézou, kde sa atorvastatín môže javiť ako veľmi prospešný.