Zuby sú vysoko diferencované orgány, ktoré sa skladajú z viacerých častí, akými sú sklovina, dentín, cement, zubná dreň a periodontálne tkanivá. Zuby a okolité zubné tkanivá sú prirodzeným zdrojom kmeňových buniek, ktoré sú súhrnne nazývané zubné kmeňové bunky (ZKB). Potenciál klinického využitia týchto buniek spočíva predovšetkým vo výborných proliferačných a diferenciačných vlastnostiach, vďaka ktorým môžu byť ZKB využívané ako terapeutický zdroj. Ďalšou výhodou ZKB je ich neinvazívne a finančne dostupné získavanie, keďže mliečne zuby prirodzene vypadávajú a dospelé zuby sa často extrahujú z klinických a ortodontických dôvodov. V našom výskume sa zameriavame predovšetkým na osteodiferenciačný potenciál zubných kmeňových buniek, ktoré v budúcnosti môžu byť aplikované v liečbe poškodených kostí po ochoreniach a zraneniach, nakoľko súčasné metódy nie sú v mnohých prípadoch dostatočné.
Cieľom prezentovanej práce bolo porovnať osteodiferenciačný potenciál zubných kmeňových buniek, izolovaných zo zubnej drene pacienta, kultivovaných v rôznych kultivačných podmienkach. Bunky sme diferencovali v komerčne dostupnom osteodiferenciačnom médiu, ktoré sme porovnávali s pripraveným osteodiferenciačným médiom. Súčasne sme porovnali schopnosť buniek diferencovať sa na osteoblasty/osteocyty respektíve odontoblasty/odontocyty v 2D a 3D kultivačných podmienkach. Sledovali sme morfologické zmeny buniek v priebehu osteodiferenciácie pomocou svetelnej mikroskopie, následne sme pomocou fluorescenčnej mikroskopie vizualizovali špecifické proteíny a prostredníctvom farbenia buniek Alizarínovou červenou, ktorá je ukazovateľom vápenatých zlúčenín produkovaných osteodiferencovanými bunkami, sme analyzovali a kvantifikovali prítomnosť kalcifikátov a účinnosť osteodiferenciácie.
Potvrdili sme, že účinnosť osteodiferenciácie komerčným médiom je výrazne vyššia v porovnaní s pripraveným médiom. Bunky v 2D podmienkach vytvárali extracelulárnu matrix, ktorá kopíruje vlastnosti kostného tkaniva.
Táto práca bola finančne podporená GUK 65/2022 a VEGA projektom 1/0310/21.