Hladiny vybraných pterínov v moči pacientok s nádorovým ochorením vaječníkov

Hladiny vybraných pterínov v moči pacientok s nádorovým ochorením vaječníkov

Celkové hodnotenie

Vedecká práca
100%
Prevedenie (dizajn)
100%
Diskusná interakcia
100%
PoužívateľVedecká prácaDizajnDiskusná interakcia
Mgr. Eva Duborská100%100%-
Milan Zvarík100%100%-
RNDr. Erika Kellerová PhD.100%100%100%
Mgr. Jana Havlíková100%-100%
ISBN: 978-80-972360-0-7

Hladiny vybraných pterínov v moči pacientok s nádorovým ochorením vaječníkov

Katarína Kolníková1 , Milan Zvarík , Libuša Šikurová ,
1 Fakulta matematiky, fyziky a informatiky Univerzity Komenského, Bratislava,
kolnikova.katarina@gmail.com

Včasná diagnostika onkologického ochorenia je kľúčovým prvkom v rámci iniciovania správnej terapie, a teda aj vo vyššej šanci na vyliečenie. Prognóza býva zväčša nepriaznivá a majorita pacientov sa z choroby nevylieči. Snahou lekárov a vedeckých pracovníkov je preto nájsť takú diagnostickú metódu, ktorá stanoví onkologické ochorenie ešte v jeho rannom štádiu, kedy sú šance na vyliečenie relatívne vysoké.

Potenciálnou diagnostickou metódou sa javí byť stanovovanie biomarkerov z telesných tekutín ako je krv alebo moč. Pteríny, ako potenciálne biomarkery, sa v súčasnosti intenzívne skúmajú, pretože doterajšie výskumy ukázali ich dôležitosť pri diagnostike onkologického ochorenia. Ukazuje sa totiž, že u pacienta s onkologickým ochorením je prítomná ich zvýšená koncentrácia v moči [1,2].

V predkladanej práci sa zaoberáme stanovovaním neopterínu, biopterínu a pterínu voči kreatinínu v moči onkologických pacientok metódou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie, tzv. HPLC. Onkologickým pacientkam bol diagnostikovaný malígny (diagnóza C56, n = 20) alebo benígny nádor vaječníkov (diagnóza D27, n = 21). Vzorky moču pacientok sme porovnali so vzorkami moču zdravých dobrovoľníčok (n = 32). Pteríny boli detegované fluorescenčným detektorom pri excitácii 350 nm a emisii 450 nm, kreatinín absorpčným detektorom pri 235 nm.

Zistili sme signifikantný nárast v hladine všetkých troch pterínov vzhľadom na kreatinín v moči onkologických pacientok (s malígnym ako aj benígnym nádorom) voči zdravým kontrolám, p < 0,01. Najlepšie hodnoty pre diagnostický test sme dostali v prípade neopterínu, kedy na odlíšenie zdravých dobrovoľníčok od pacientok s malígnym nádorom dosiahol test 100 % senzitivitu a 90 % špecificitu. Test na odlíšenie zdravých dobrovoľníčok od pacientok s benígnym nádorom mal 93,75 % senzitivitu a 95,23 % špecificitu. Ďalej sme našli signifikantne zvýšenú hladinu neopterínu vzhľadom na kreatinín u pacientok s malígnym nádorom vaječníka v porovnaní s pacientkami s benígnym nádorom, p < 0,05. Domnievame sa, že tento rozdiel mohol byť spôsobený rôznou aktiváciou imunitného systému pacientok [3]. Pri použití neopterínu na odlíšenie pacientok s malígnym nádorom vaječníkov od benígneho nádoru vaječníkov dosiahla senzitivita testu 70 % a špecificita 71,4 %. Rozdiel v hladine biopterínu a pterínu vzhľadom na kreatinín medzi malígnou a benígnou skupinou pacientok nebol pozorovaný.

Naša práca poukázala na možnosť využitia pterínov ako potenciálnych skríningových alebo diagnostických onkomarkerov. Aby zaznamenané zmeny v hladinách pterínov v moči skúmaných vzoriek mali jednoznačnú výpovednú hodnotu a mohli byť využité v klinickej praxi, je potrebné vykonať ďalšie rozsiahlejšie štúdie.

Poďakovanie: 
Zdroje: 

[1] Gamagedara, S. et al. Clinica Chimica Acta2011, 412, 120-128.
[2] Girón, A.J. et al. Talanta2012, 101, 465-472.
[3] Melichar, B. et al. Pteridines2010, 21, 87-93.

Diskusia

Dobrý deň Katka, gratulujem k veľmi peknej záverečnej práci. Problematika je veľmi dôležitá a veľmi komplexná, pretože výsledky a ich spoľahlivosť sú viazané na usporiadanie klinickej štú...�die. Ale aj v „modelových“ podmienkach výberu prípadov a kontrol na základe niektorého z nerandomizačných spôsobov výberu ste dokázali spraviť veľký kus práce. Moja otázka sa týka prípravy (štandardizácie „zahustenia“) vzorky moču pre stanovenie koncentrácie testovaných potenciálnych onkomarkerov. Ako bolo zabezpečené spoľahlivé porovnanie skupín? Komentár k vete „Prognóza býva zväčša nepriaznivá a majorita pacientov sa z choroby nevylieči.“ Je lepšie uvádzať konkrétne údaje, v tomto prípade by sa hodilo uviesť nejaké konkrétne epidemiologické údaje (verejne dostupné sú grafy vývoja prevalencie a incidencie (na 100tis. žien), prípadne aj vekovošpecifická prevalencia a incidencia, plus aspoň celkový medián prežívania (bez ohľadu na štádium pri diagnostikovaní) apod. Pozdravujem a držím palce k obhajobe. Iveta Waczulíková

Dobrý deň, pani docentka. Ďakujem Vám za reakciu na môj príspevok. Čo sa týka prípravy a štandardizácie vzoriek, tak každá vzorka bola pripravená rovnakým spôsobom, moč bol centrifugovaný a následne supernatant bol oxidovaný (aby sme vedeli snímať fluorescenciu pterínov). Koncentráciu pterínov sme v moči stanovovali vzhľadom na hladinu kreatinínu v moči daného pacienta, resp. zdravého dobrovoľníka. Kreatinín je látka, ktorá sa používa na normovanie vzoriek moču, pretože jeho vylučovanie za deň je relatívne konštantné (Wagner, B.D. et al., J Cyst Fibros,2010, 9(3)212-216). Výsledné koncentrácie pterínov v moči tak boli uvedené vzhľadom na koncentráciu kreatinínu v moči. A ďakujem za upozornenie a radu uvádzať konkrétne hodnoty - prevalencia a pod. Budem si na to dávať v budúcnosti pozor. Ďakujem veľmi pekne. Katarína Kolníková

Ďakujem za odpoveď, Katka. Ešte sa chcem spýtať - ten moč bol asi zbieraný nejaké obdobie, povedzme 24 hodín, pravda? Inak si moc neviem predstaviť štandardizáciu podmienok a vzoriek medzi jednotlivými subjektami. Pozdravujem, Iveta Waczulíková

Boli zabezpečené rovnaké podmienky pre obder moču. Bol zbieraný ranný moč pacientok aj zdravých dobrovoľníčok. Katarína Kolníková

Dobrý deň, všimla som si, že ste uviedli, že pri terapii sa využívajú monoklonálne protilátky proti VEGF. V rámci nášho tímu pracujeme s DNA aptamérmi, ktoré v poslednej dobe svojimi vlastnosťami často prekonávajú protilátky. Chcem sa preto opýtať, či by podľa Vás bolo teoreticky možné využiť na terapiu aj DNA aptaméry?

Dobrý deň, na túto otázku Vám neviem priamo odpovedať, pretože my sme sa venovali hlavne diagnostike. Terapiou ako takou, a teda ani terapiou DNA aptamérmi sme sa nezaoberali. Avšak, je tu istý potenciál pre použitie aptamérov aj v spojení nanočastíc. V nasledujúcom článku sa tomu venujú: https://www.google.sk/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1&ved=0ahUKEwjVvJL05fLMAhVGtRQKHZs3BwoQFgghMAA&url=http%3A%2F%2Fwww.mdpi.com%2F2227-9059%2F3%2F3%2F248%2Fpdf&usg=AFQjCNHGhRDvA01ETLH0Bg6yYfdfC0JKfg&sig2=WaqYwokPemaKHI-CzjZyLA&cad=rja. Katarína Kolníková

Ďakujem za odpoveď