Vytváranie nových biomedicínskych in vitro modelov pre liečbu amyotrofickej laterálnej sklerózy technikou reprogramovania buniek

Vytváranie nových biomedicínskych in vitro modelov pre liečbu amyotrofickej laterálnej sklerózy technikou reprogramovania buniek

Celkové hodnotenie

Vedecká práca
95%
Prevedenie (dizajn)
100%
Diskusná interakcia
100%
PoužívateľVedecká prácaDizajnDiskusná interakcia
RNDr. Terézia Okajčeková100%100%100%
RNDr. Romana Záhumenská PhD.100%100%100%
Mgr. Kristína Ormandyová100%100%100%
MVDr. František Zigo PhD.80%--
ISBN: 978-80-972360-2-1

Vytváranie nových biomedicínskych in vitro modelov pre liečbu amyotrofickej laterálnej sklerózy technikou reprogramovania buniek

Romana Záhumenská1,2 , Ján Strnádel , Erika Halašová3 ,
1 Divízia Molekulová Medicína, BioMed Martin, Jesseniova lekárska fakulta v Martine, Univerzita Komenského v Bratislave, Slovenská republika
2 Ústav lekárskej biochémie, Jesseniova lekárska fakulta v Martine, Univerzita Komenského v Bratislave, Slovenská republika
3 Ústav lekárskej biológie, Jesseniova lekárska fakulta v Martine, Univerzita Komenského v Bratislave, Slovenská republika
romana.zahumenska@gmail.com

Amyotrofická laterálna skleróza (ALS) patrí medzi neurodegeneratívne ochorenia s veľmi progresívnym priebehom. Toto ochorenie postihuje predovšetkým motoneuróny centrálnej a periférnej nervovej sústavy. Strata spinálnych a cerebrálnych motorických neurónov, ovplyvňujúcich vedomé svalové pohyby, vedie postupne u pacientov až k celkovej paralýze organizmu a ku zlyhaniu respiračného systému, zatiaľ čo ich mentálne a psychické aspekty ostávajú plne zachované.

Indukované pluripotentné kmeňové bunky (iPSCs) sa ponúkajú ako nový, sľubný, terapeutický prístup v oblasti regeneratívnej medicíny. Technológia iPSCs zatiaľ nie je v štádiu, kedy by sa terapeutické transplantácie považovali za bezpečné a využívali sa denne v klinickej praxi. V posledných rokoch sa však výrazne podieľajú na procese personalizovanej liečby a jej snahách pri modelovaní in vitro biomedicínskych prototypov nielen pre neurodegeneratívne ochorenia.

V našej štúdii, ktorá momentálne prebieha, pripravujeme nový, unikátny in vitro biomedicínsky model ALS s využitím techniky reprogramovania somatických kožných fibroblastov pacienta trpiaceho ALS na iPSCs. Následne tieto bunky budeme diferencovať do neurálnych prekurzorov, ktoré sa budú charakterizovať a fenotypizovať metódou fluorescenčnej prietokovej cytometrie BD FACS Aria.

Poďakovanie: 

Táto práca bola podporená projektom VEGA 1/0279/18 a projektom „Martinské centrum pre biomedicínu (BioMed Martin)“ ITMS kód projektu: 26220220187, ktorý je spolufinancovaný zo zdrojov EÚ.

Zdroje: 

Diskusia

Dobry den, prepacte, ak polozim naivnu a laicku otazku, ale myslim si, ze v problematike, ktorou sa zaoberate sa aj zainteresovani este len ucia za pochodu. Ide o doposial nie velmi prebadanu, zato vsak elmi progresivnu oblast! Drzte sa toho! Mohli by ste, prosim vas, objasnit technologiu reprogramovania somatických buniek na indukované pluripotentné kmeňové bunky, ako sa to robi, co je jej podstatou z hladiska molekularnych mechanizmov. Rada si takto doplnim vedomosti, vopred dakujem za informacie. ZB

Dobrý deň, ďakujem veľmi pekne za otázku a ospravedlňujem sa, že reagujem o čosi neskoršie. Mechanizmus indukcie pluripotentných buniek zo somatických buniek, spočíva v zavedení transkripčných/ reprogramujúcich faktorov do bunky, či už metódou transdukcie alebo transfekcie. Pôvodne boli použité 4 faktory – Oct4, Sox2, cMyc, Klf4, my pracujeme s komerčným kitom so syntetickou RNA, kódujúcou faktory Oct4, Klf4, Sox2 a Glis, ale keďže cMyc a Klf4 sú radené medzi silné protoonkogény (cMyc indukoval vznik malígnych nádorov vo viacerých štúdiách in vivo a gén pre Klf4 prispieval ku prenášaniu nádorovej informácie na dcérske bunky), je v súčasnosti dostupných viacero variant resp. kombinácií iných faktorov ako je napr. Yap. Genetická informácia, zvyčajne okrem transkripčných faktorov kóduje aj určitý reportérový gén, v našom prípade syntetická RNA obsahovala gén, ktorý bunkám zabezpečoval rezistenciu na antibiotikum puromycín, transfekované kolónie boli neskôr takýmto spôsobom selektované a izolované. Celá procedúra reprogramovania je popísaná aj na oficálnej webovej stránke https://www.merckmillipore.com/SK/sk/product/Simplicon-RNA-Reprogramming-Kit-OKSG,MM_NF-SCR550#anchor_BRO . V prípade ďalších otázok ma neváhajte kontaktovať, prajem Vám príjemný deň.RZ