Úvod: Napriek výrazným pokrokom v terapii nádorových ochorení v posledných desaťročiach a množstvu novo vyvinutých chemoterapeutík ostáva úspešnosť liečby týchto ochorení často neuspokojivá. Je preto dôležité hľadať nové spôsoby terapie a skúmať látky s možným využitím v terapii onkologických ochorení. Jednou z možností kde tieto látky hľadať sú rastliny používané vo východnej medicíne a tradičnom liečiteľstve. Viacero rôznych látok s antiproliferatívnym účinkom na rakovinové bunky už bolo objavených práve v rastlinách používaných v alternatívnej medicíne a fytoterapii.[1, 2, 3, 4] V našom experimente sme sa sledovali vplyv výluhu listov Combretum micranthum na proliferáciu a indukciu apoptózy v bunkovej línii HT-29 (adenokarcinóm hrubého čreva).
Materiál a metódy: Usušené listy Combretum micranthum sme rozdrvili a lúhovali v DMEM pri teplote 80˚C počas 20 minút. Zriedením s DMEM sme z výluhu vytvorili 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125% a 1,5625% roztoky. Roztoky sme nechali pôsobiť počas 24, 48 a 72 hodín na bunkovú líniu HT-29. Pomocou testu cytotoxicity MTT (kolorimetrický test založený na princípe rozloženia pridaného farbiva mitochondriálnymi enzýmami živých buniek) a testu apoptózy Muse™ Annexin V and Dead Cell Assay (fluorescenčná detekcia fosfatidylserínu na povrchu apoptotických buniek v prietokovom cytometri) sme stanovili mieru proliferácie a množstvo apoptotických buniek.
Výsledky: Z našich meraní vyplynulo, že roztok vytvorený vyluhovaním listov rastliny Combretum micranthum v DMEM (Dulbecco´s Modified Eagle´s Medium) pri 80˚C počas 20 minút mal značný vplyv na proliferáciu a indukciu apoptózy v bunkovej línii HT-29. Čím menšie riedenie výluhu bolo použité, tým väčší vplyv na proliferáciu buniek sme pozorovali. Z výsledkov usudzujeme, že látky prítomné v listoch tejto rastliny indukujú apoptózu a znižujú proliferáciu v použitej bunkovej línii.
Záver: Z výsledkov usudzujeme, že výluh z listov rastliny Combretum micranthum indukuje apoptózu a znižuje proliferáciu buniek HT-29. Z našich meraní vyplýva, že výluh má významné antiproliferatívne účinky na bunky adenokarcinómu hrubého čreva a táto rastlina by mohla byť použitá pri vývoji nových chemoterapeutík.
Grant mladých UK č. UK/84/2016.
Annona?
Dobrý deň, zaujímalo by ma, aké výsledky dosahuje Combretum v porovnaní s Vami študovanou Annonou Muricatou? Ktorá z týchto dvoch rastlín má podľa Vás väčší potenciál pre farmaceutické využitie? Ďakujem.