Amyotrofická laterálna skleróza (ALS) je závažné, neurodegeneratívne ochorenie, ktoré je charakteristické progresívnou stratou horných a dolných motorických neurónov. Progresia ochorenia vedie ku paralýze organizmu, neschopnosti dýchať a prehĺtať. Priemerná dĺžka prežitia pacientov po diagnostikovaní ochorenia sa odhaduje na 2-4 roky, pričom 5 rokov po diagnostikovaní prežije len necelých 10% pacientov. Z etiologického hľadiska sa jedná o multifaktoriálne, multigénne a multiorgánové ochorenie s nejasnou príčinou vzniku Translácia teoretických poznatkov do klinickej roviny nie je dostatočne efektívna, výsledkom čoho je neuspokojivá liečba ALS, ktorá nerieši príčinu ochorenia, ale len potláča klinické príznaky. Dostupnosť neurálneho tkaniva pre biomedicínsky výskum je značne obmedzená. Alteratívnym riešením sú in vitro modely pripravené pomocou indukovaných pluripotentných kmeňových buniek (iPSC).
Príprava novej, unikátnej, komplexne charakterizovanej bunkovej línie je časovo náročný a zdĺhavý proces. Bunkovú líniu iALS-01 sme pripravili z dermálnych fibroblastov, izolovaných z kožnej biopsie pacienta s diagnostikovanou sporadickou formou ALS v procese reprogramovania, pomocou syntetickej, polycystronickej, samoreplikujúcej RNA, kódujúcej 4 transkripčné faktory. Jednotlivé bunkové štádiá sme biologicky charakterizovali na morfologickej, fenotypovej, genetickej a molekulárnej úrovni. Vykonali sme tiež sériu in vivo experimentov, pričom histopatologická analýza tenkých tkanivových rezov potvrdila schopnosť pluripotencie iALS-01. Výsledkom jednotlivých analýz je komplexne biologicky charakterizovaná, prvá slovenská iALS línia.
Táto práca bola podporená projektom APVV-17-0037, VEGA 1/0279/18, GUK 366/2020 a GUK 032/2021.
iALS oproti kontrolnym iPSC
Mate velmi peknu pracu. :) Chcela som sa opytat, ci ste uz porovnavali Vase iALS oproti kontrolnym pluripotentnym kmenovym bunkam vytvorenym z fibroblastov zdraveho cloveka a ake boli napriklad odlisnosti. Dakujem!
Re: iALS oproti kontrolnym iPSC
Dobrý deň, ďakujem Vám veľmi pekne za otázku :). Našu iALS líniu sme experimentálne neporovnávali s kontrolnými iPSC vytvorenými z fibroblastov zdravého človeka. Z dôvodu, že sme pripravovali in vitro model pre sporadickú formu ALS, by bol tento doplnkový experiment finančne a časovo náročný, s nie dostatočne relevantnou výpoveďou. Pokiaľ by sa jednalo o prípravu in vitro modelu familiárnej formy ALS, uvažovali by sme o jeho uskutočnení, predovšetkým ak by sme mali možnosť získať informovaný súhlas a biologickú vzorku od zdravého príbuzného pacienta s ALS.