Ľudské alogénne kostné tkanivo v kombinácii s mezenchymálnymi stromálnymi bunkami (MSB) predstavuje atraktívny kompozitný implantát, vhodný na aplikáciu pri liečbe kostných defektov. Alogénne kostné štepy majú pórovitú štruktúru, ktorá umožňuje transport živín a biochemických komponentov a zlepšujú regeneráciu kostných defektov. Slúžia ako priestorový nosič podobný mikroprostrediu kostnej drene, ktorý napomáha indukcii MSB do osteogénnej diferenciácie in vitro. Tukové tkanivo predstavuje atraktívnu alternatívu kostnej drene ako zdroja MSB. Bunky izolované z tuku majú podobné vlastnosti ako bunky kostnej drene, aj ich diferenciačná schopnosť je ekvivalentná. Značnou výhodou je ich menej invazívny spôsob odberu. V našej práci sme sledovali prítomnosť a adherenciu mezenchymálnych stromálnych buniek nasadených na alogénne kostné štepy. MSB sme izolovali z podkožného tuku enzymatickou digesciou. Alogénne kostné štepy boli pripravené z kondylu femuru od kadaveróznych darcov. Na základe výsledkov prietokovej cytometrie (bunky pozitívne na CD73, CD90, CD105 a negatívne na CD45, CD34, CD14, CD20) a stanovenia diferenciačného potenciálu pomocou histochemického farbenia (diferenciácia do osteoblastov, chondrocytov a adipocytov) sme potvrdili, že bunky izolované z tuku sú MSB. Po nasadení neznačených a PKH 26 značených buniek na alogénne kostné štepy sme pomocou metódy SEM a fluorescenčnej mikroskopie potvrdili adherenciu neznačených buniek a prítomnosť značených MSB na alogénnom kostnom tkanive.
Táto práca bola uskutočnená za podpory grantov VEGA 1/0772/13, APVV- 0684 -12 a MediPark ITMS: 26220220185.
otazka
Dobry den. Mozu pocas diferenciacie vznikat aj nadorove bunky? viete ich rozpoznat od zdravych? dakujem
Re: otazka
Dobry den,
diferencovane bunky charakterizujeme na zaklade expresie povrchovych markerov pomocou ktorych definujeme zdrave bunky. Nie su poznatky o tom ze by sa mezenchymalne bunky diferencovali do nadorovych buniek.
odpoved