Escherichia coli je jedným z najviac využívaných expresných systémov na nadprodukciu prokaryotických aj eukaryotických proteínov. Existuje množstvo nástrojov a protokolov na vysokú produkciu heterologických proteínov, množstvo expresných plazmidov, bakteriálnych kmeňov a kultivačných stratégii, ktoré sa dajú použiť. Produkcia rekombinantného proteínu je pre hostiteľskú bunku záťažou, pričom v extrémnych prípadoch ani nedochádza k expresii daného proteínu alebo dochádza k akumulácii degradovaného proteínu, prípadne proteín spadá do inklúznych teliesok. [1]. Na efektívnu expresiu problémových membránových proteínov sa preto často využívajú rôzni fúzni partneri, ktorí monitorujú expresiu proteínu alebo jeho ľahšiu purifikáciu. Medzi najznámejších fúznych partnerov patrí His-tag, tioredoxín alebo GFP [2,3]. Ďalšou z možných stratégii je koexpresia chaperónov, ktoré napomáhajú správnemu skladaniu proteínu [4]. V tejto práci sme sa zamerali na transmembránový proteín TerC pochádzajúci z teluričitanového operónu, ktorého presná štruktúra a funkcia nie je doposiaľ známa [5].

Cieľom tejto práce je exprimovať a purifikovať proteín TerC v E. coli. Membránový proteín TerC by sa mohol ďalej využiť ako interný proteínový štandard pre ostatné membránové proteíny pri hmotnostnej spektrometrii.

Podarilo sa nám exprimovať proteín TerC vo fúzii s tioredoxínom, ktorý  zvyšuje jeho rozpustnosť. Úspešnosť expresie sme overili pomocou SDS-PAGE. Následne sme TerC purifikovali pomocou ultracentrifugácie a afinitnej chromatografie. Pomocou Western blotu sme overili prítomnosť proteínu TerC vo vzorke a na géli po SDS-PAGE analýze sme zistili, že TerC je kontaminovaný inými proteínmi. Preto sú potrebné ďalšie purifikačné kroky, ktorými by sme dosiahli vyššiu čistotu proteínu TerC.