D-apióza je vetvený monosacharid, ktorý je súčasťou rôznorodých komplexných oligoglykozidov nachádzajúcich sa v liečivých rastlinách. Prírodné látky, obsahujúce β-D-apiofuranozid vo svojej štruktúre (napr. kelampayozidy, kukurbitozidy, luteozidy),¹ sa častokrát vyznačujú pozoruhodnými biologickými aktivitami.² Avšak ich hlbšie štúdium a potenciálne terapeutické využitie je brzdené náročnosťou ich izolácie z rastlín ako aj komplikovanosťou ich syntézy. Preto narastá potreba vypracovania efektívnejších syntetických metód vedúcich k ich menej komplikovanej príprave.

D-apiozidázy sú hydrolázy, ktoré sú schopné hydrolyzovať väzby medzi β-D-apiofuranózou a zvyšným oligosacharidom v rastlinnom materiáli.³ Menej známou katalytickou vlastnosťou niektorých glykozidáz, je, že v určitých podmienkach sú schopné syntetizovať a v reakcii využiť aj iný akceptor ako vodu, napríklad ďalší glykozid.

V súčasnosti sa naše laboratórium zaujíma o detekciu D-apiozidázových aktivít v rôznych enzýmových preparátoch s cieľom enzymaticky pripravovať β-D-apioglykozidy. V tomto príspevku prezentujeme syntézu 4-nitrofenyl-β-D-apiofuranozidu, chromogénneho substrátu pre spektrofotometrické stanovenie β-D-apiozidáz. Substrát bol pripravený v piatich krokoch s 56% celkovým výťažkom, (36% v 10 krokoch z D-manózy). Vychádzajúc z 2,3-O-izopropylidén-α,β-D-apiofuranózy (1), ktorá bola syntetizovaná modifikáciou dvoch už publikovaných metód z D-manózy,⁴ sa v prvom kroku využila regioselektívna enzymatická benzoylácia primárneho hydroxylu apiofuranózy 1 lipázou LPL-100T s použitím vinylbenzoátu ako acyl donoru, čo poskytlo 5-O-benzoyl-2,3-O-izopropylidén-α,β-D-apiofuranózu (2) v 95% výťažku (α/β = 1:4). Odstránenie izopropylidénacetálu v zlúčenine 2 80% vodným roztokom kyseliny mravčej poskytla 5-O-benzoyl-α,β-D-apiofuranózu (3) v 92% výťažku (α/β = 0.55:1). Následne sa zlúčenina 3 acetylovala použitím acetanhydridu a pyridínu, čo poskytlo 5-O-benzoyl-1,2,3-tri-O-acetyl-α,β-D-apiofuranozid (4) v 91% výťažku (α/β = 1:2). Furanozid 4 predstavuje glykozyl donor, potrebný pre finálnu glykozylačnú reakciu. Ako vhodný promótor glykozylačnej reakcie zlúčeniny 4 so 4-nitrofenolom sa ukázala zmes BF₃.OEt₂ a TEA, ktorá poskytla zmes anomérov 4-nitrofenyl-5-O-benzoyl-2,3-di-O-acetyl-α,β-D-apiofuranozidu (5) v pomere (α/β = 1:10) v 77% výťažku. Deacylácia anomérnej zmesi 5 metanolátom sodným v metanole poskytla 4-nitrofenyl-β-D-apiofuranozid v 91% výťažku.