Proteomická analýza moču si v dnešnej dobe získava čoraz väčšiu pozornosť, pretože moč môže byť získavaný neinvazívnym spôsobom, vo veľkých množstvách a jeho odber sa dá v prípade potreby veľmi ľahko zopakovať. Proteíny prítomné v exozómoch v moči môžu byť potenciálnymi biomarkermi ochorení močového a urogenitálneho traktu. Exozómy sú malé nanovezikuly endozomálneho pôvodu, ktoré obsahujú membránové a cytosólické proteíny materských buniek a preto sú považované za veľmi cenný zdroj informácií o fyziologickom alebo patofyziologickom stave organizmu. V našej práci sme sa zamerali na izoláciu a identifikáciu proteínov prítomných v močových exozómoch. Na izoláciu exozómov bola použitá metóda diferenciálnej ultracentrifugácie a mikrofiltrácie, ktoré v súčasnosti patria medzi obľúbené metódy izolácie exozómov z biologických vzoriek. Celkovo sa nám podarilo identifikovať 104 proteínov, ktoré sme rozdelili do skupín na základe ich funkcie. Medzi týmito identifikovanými proteínmi boli aj proteíny CD9 a CD63, ktoré sú považované za membránové markery exozómov a tým sme potvrdili účinnosť diferenciálnej ultracentrifugácie pri izolácii exozómov z moču a účinnosť mikrofiltrácie pri sepáracii exozómov od ostatných extracelulárnych vezikúl (ektozómov a apoptických pľuzgierikov).
podiel exozomov
Dobry den,
vase praca ma zaujala, pretoze dopyt po neinvazivnych a ucinnych metodikach detekcie je vysoky. Je ale skoda, ze mne osobne vas poster nacitalo velmi zle.
Zaujimalo by ma aky casty je vyskyt exozomov v moci, resp ako ucinna je dana metodika v separacii exozomov.
Dakujem za odpoved a drzim palce.
Re: podiel exozomov
Dobry den,
dakujem a ospravedlnujem sa za oneskorenu odpoved. Zucastnila som sa tejto konferencie po prvykrat az neskor som si vsimla vase otazky. Exozomy su pritomne v kazdom moci a su v nom pritomne za fyziologickych ako aj za patofyziologickych podmienok. Niektore zdroje uvadzaju ze za patofyziologickych podmienok su vylucovane vo zvysenych mnozstvach. Exozomy boli najdene aj v dalsich telovych tekutinach ako su napr. plazma, materske mlieko, synovialna tekutina, sliny, plodova voda a ine. Co sa tyka ucinnosti izolacie a separacie exozomov, existuju aj ucinnejsie metody v porovnani s nasou metodou (napr. magneticke gulicky s naviazanymi protilatkami). Tieto metody su zalozene na reakcii protilatka-antigen avsak nevyhodou tychto metod je ich financna narocnost. Dakujem Vam za otazky a prajem pekny den.
otazka
Dobry den, mna by zaujimalo, ze ako je financne narocna tato metodika, ci je schopna financne konkurovat dnes pouzivanym metodam.
Este sa chcem opytat ci je touto metodikou mozne na zaklade hladin urcitych proteinov vytipovat aj druh ochorenia. dakujem
Re: otazka
Dobry den,
taktiez sa ospravedlnujem za oneskorenu odpoved. Tato metodika je financne menej narocna v porovnani s metodami pri ktorych je potrebne mat k dispozicii protilatky k proteinom, ktore sa nachadzaju v membrane exozomov aby bolo mozne tieto exozómy vyizolovat z biologickych vzoriek. Co sa tyka druhej otazky, zatial sme sa v praci zamerali na optimalizaciu izolacie exozomov zo vzoriek moca zdravych ludi. V buducnosti by sme sa chceli zamerat aj na porovnanie proteomu exozomov vyizolovanych z moča zdravych ludi a proteomu exozomov pacientov trpiacich na urcite ochorenie. Po porovnani by sme mohli nasledne sledovat kvalitativne a pripadne aj semikvantitativne zmeny v proteinoch a na zaklade toho identifikovat potencialne biomarkery tohto ochorenia. Dakujem za Vase otazky a prajem pekny den.