Diferenciácia mezenchýmových stromálnych buniek

Diferenciácia mezenchýmových stromálnych buniek

Celkové hodnotenie

Vedecká práca
100%
Prevedenie (dizajn)
80%
Diskusná interakcia
100%
PoužívateľVedecká prácaDizajnDiskusná interakcia
Štefan Lukáč100%80%100%
ISBN: 978-80-970712-8-8

Diferenciácia mezenchýmových stromálnych buniek

Filip Mochnacký1 , Jana Plšíková , Ján Rosocha
1 Združená tkanivová banka UPJŠ LF a UN LP, Košice, Trieda SNP 1, 040 11 Košice
filip.mochnacky@gmail.com

Mezenchýmové stromálne bunky (MSC) sú pluripotentné nehematopoetické kmeňové bunky, ktoré je možné izolovať napríklad z kostnej drene, tukového tkaniva a periostu. Musia exprimovať povrchové markery CD73, CD90 a CD105 a naopak nesmú exprimovať hematopoetické markery. Za určitých podmienok môžu diferencovať do adipocytov, chondrocytov, osteoblastov a iných bunkových línií. Majú schopnosť migrovať do miesta poškodenia tkaniva, kde sa podieľajú na jeho oprave a preto sú v súčasnosti intenzívne študované pre ich potencionálne využitie v klinickej praxi. Keďže cieľom našej práce bolo dokázať, že nami izolované bunky z tukového tkaniva sú mezenchýmové stromálne bunky, sledovali sme najmä ich schopnosť adherencie, imunofenotypovú charakterizáciu pomocou prietokovej cytometrie a schopnosť diferencovať do adipocytov, chondrocytov a osteoblastov v in vitro podmienkach. Z našich výsledkov vyplýva, že bunky po izolácii enzymatickou digesciou boli schopné adherovať na kultivačnú fľašu a boli pozitívne na CD73, CD90, CD105 a negatívne na hematopoetické markery CD45, CD34, CD14 a CD20. Diferenciáciu týchto buniek do adipocytov, chondrocytov a osteoblastov sme  dokázali pomocou histochemického farbenia s Oil Red O (tukové vakuoly adipocytov), Alcian Blue (glykozaminoglykány produkované chondrocytmi) a Alizarin Red (kalciové usadeniny vytvorené produkciou vápnika osteoblastmi). Na základe našich výsledkov môžeme potvrdiť, že bunky izolované z tuku sú mezenchýmové stromálne bunky.

Poďakovanie: 

Tento projekt bol podporený grantmi VEGA 1/0772/13, APW-0684-12 a Medipark ITMS: 26220220185.

Zdroje: 

Diskusia

Zdravím Vás Filip,
blahoželám k zaujímavej práci a chcel by som Vám položiť niekoľko otázok. Overovali ste teda, či Vami izolované bunky z tukového tkaniva sú mezenchimálne kmenove bunky a ich schopnost diferenciácie, ak tomu správne rozumiem. Kto tieto bunky odoberal a od akých pacientov boli získané? Boli následne tieto pacientom podané pri rekonštrukčných operáciach? Je možné na základe Vami získaných poznatkov izolovat bunky z tukového tkaniva a aplikovať ich pacientom napríklad po osteosarkóme, osteonekrózach alebo sifilitických poškodeniach chrupiek? Aké sú obmedzenia takejto terapie? ďakujem za odpoveď.

Dobrý deň,
bunky boli izolované z podkožného tuku na Klinike plastickej, rekonštrukčnej a estetickej chirurgie. Tukové tkanivo bolo získané od zdravého pacienta pri estetickej chirurgii a bunky z neho boli následne izolované. Tieto bunky neboli podané pri rekonštrukčných operáciách ale boli využité pre vedecké účely. Čo sa týka aplikácie, tak v súčasnosti prebiehajú stále klinické testy a je potrebný ďalší výskum a štandardizácia postupov. MSC sa ukazujú ako potencionálne využiteľné pri liečbe chrupiek a kostí ale aj pri liečbe diabetu alebo infarktu myokardu. V Združenej tkanivovej banke UPJŠ LF a UN LP sa výskum zameriava na potencionálnu liečbu osteoartrózy. Čo sa týka obmedzení, tak je stále problém získať čistú kultúru MSC a taktiež ich využitie pri liečbe nádorových ochorení je sporné. Síce sú štúdie, ktoré hovoria o potencionálnom využití MSC v nádorovej terapii, tak sú naopak štúdie, ktoré hovoria o negatívnom vplyve MSC pri takejto terapii. Konkrétne ak ste sa pýtali na ten osteosarkóm, tak existuje štúdia, ktorej výsledky hovoria o podpore proliferácie buniek osteosarkómu po aplikovaní MSC. Taktiež aj čo sa týka osteoartrózy je liečba pomocou MSC vhodná v skorých štádiách ochorenia. Pri neskorých štádiách už liečba nie je účinná.