Molekulárna charakterizácia génov pre biosyntézu forosomínu ako deoxyaminosacharidovej zložky angucyklínového antibiotika auricínu v Streptomyces aureofaciens CCM3239

Molekulárna charakterizácia génov pre biosyntézu forosomínu ako deoxyaminosacharidovej zložky angucyklínového antibiotika auricínu v Streptomyces aureofaciens CCM3239

Celkové hodnotenie

Vedecká práca
100%
Prevedenie (dizajn)
100%
Diskusná interakcia
100%
PoužívateľVedecká prácaDizajnDiskusná interakcia
Mgr. Romana Chovanová100%100%-
RNDr. Csilla Patasi100%100%-
Mgr. Tomáš Grivalský100%100%100%
Mgr. Evelína Turňová100%100%-
Mgr. Michal Šelc100%100%-
Bc. Kristína Sihelská100%100%-
RNDr. Erik Mingyár100%100%-
Mgr. Nina Kunová100%100%-
ISBN: 978-80-970712-6-4

Molekulárna charakterizácia génov pre biosyntézu forosomínu ako deoxyaminosacharidovej zložky angucyklínového antibiotika auricínu v Streptomyces aureofaciens CCM3239

Carmen Bekeová1 , Renáta Nováková , Ľubomíra Fecková , Erik Mingyár , Ján Kormanec
1 Ústav molekulárnej biológie SAV, Bratislava,
carmen.bekeova@savba.sk

Streptomyces aureofaciens CCM3239 patriaci do rodu Streptomyces je zaujímavým objektom štúdia nielen z hľadiska morfologickej, ale aj fyziologickej diferenciácie, ktorá zahŕňa produkciu sekundárnych metabolitov vrátane antibiotík a bioaktívnych zlúčenín. V tomto kmeni bol identifikovaný klaster génov aur1, ktorý  je zodpovedný za produkciu sekundárneho metabolitu auricínu [1].

Na základe poznatkov, že sacharidová skupina má vplyv na biologickú aktivitu angucyklínov [2] a auricín obsahuje neobvyklú sacharidovú skupinu medzi zástupcami angucyklínov sme sa rozhodli študovať biosyntézu forozamínu, deoxyaminosacharidovej zložky auricínu. Výskum bol zameraný na podrobnejšiu charakterizáciu dvoch génov sa52sa59. Gén sa52 kóduje predpokladanú NDP-aminohexóza N-dimetyltransferázu a gén sa59 predpokladanú NDP-hexóza aminotransferázu. Po delécií týchto génov sme sledovali ich vzťah k produkcii auricínu. Pri charakterizácii študovaných génov sme využívali metódy biochromatografickej analýzy, kvapalinovej chromatografie a hmotnostnej spektrometrie. Mutant ∆sa52 vykazoval značne redukovanú produkciu látky podobnej auricínu u ktorej boli odstránené metylové skupiny z deoxyaminosacharidu. U mutanta ∆sa59 nebola zaznamenaná produckcia auricínu, ale vytvárali sa deglykozylované medziprodukty auricínu. Dokázali sme, že gény sa52 a sa59 spĺňajú ich predpokladanú funkciu a hrajú dôležitú úlohu pri finálnej biosyntéze deoxyaminosacharidovej skupiny auricínu.

Poďakovanie: 

Tento projekt bol podporený Agentúrou pre podporu výskumu a vývoja pod číslom grantu APVV-0203-11.

Zdroje: 

[1] Novaková, R., Bistáková, J., Homérová, D., Řežuchová, B.,  and Kormanec, J. (2002) Cloning and characterization of a polyketide synthase gene cluster involved in biosynthesis of a proposed angucycline-like polyketide auricin in Streptomyces aureofaciens CCM3239. Gene 297, 197-208, ISSN: 0378-1119.
[2] Weymouth-Wilson, A.C. (1997) The role of carbohydrates in biologically active natural products. Nat. Prod. Rep. 14, 99-110, ISSN: 0265-0568.
 

Diskusia

Ahoj Carmen, sledovali ste vplyv auricínu, prípadne jeho medziproduktov na iné bioaktívne látky, prípadne iné morfologické alebo fyziologické funkcie vášho kmeňa CCM3239?