Vplyv omega-3 polynenasýtených mastných kyselín na expresiu okludínu tesných spojení vaskulárneho endotelu endotoxemického potkana

Vplyv omega-3 polynenasýtených mastných kyselín na expresiu okludínu tesných spojení vaskulárneho endotelu endotoxemického potkana

Celkové hodnotenie

Vedecká práca
100%
Prevedenie (dizajn)
100%
Diskusná interakcia
100%
PoužívateľVedecká prácaDizajnDiskusná interakcia
Mgr. Martina Zámorová100%100%100%
Bc. Martina Zaťková100%100%-
RNDr. Tamara Egan Beňová PhD.100%100%100%
Mgr. Csilla Viczenczová100%100%100%
Mgr. Barbora Kaločayová PhD.100%100%100%
ISBN: 978-80-970712-6-4

Vplyv omega-3 polynenasýtených mastných kyselín na expresiu okludínu tesných spojení vaskulárneho endotelu endotoxemického potkana

Jakub Križák1 , Karel Frimmel2 , Ľudmila Okruhlicová
1 Univerzita Komenského, Prírodovedecká Fakulta, Katedra živočíšnej fyziológie a etológie, Bratislava
2 Ústav pre výskum srdca, Slovenská akadémia vied, Bratislava
jakubkrizak@gmail.com

Ω-3 polynenasýtené mastné kyseliny (Ω-3 MK) redukujú výskyt a závažnosť ochorení kardiovaskulárneho systému, vrátane aterosklerózy. Tvorbe aterosklerotického plaku predchádzajú zmeny v permeabilite endotelu, ktorý predstavuje špecificky selektívnu bariéru medzi krvou a cievnou stenou. Bariérová funkcia endotelu je regulovaná interendotelovými tesnými spojeniami (TS). Okludín patrí k proteínom TS. Zmeny v jeho expresii vyvolané patofyziologickými procesmi zhoršujú jeho začleňovanie do membrány, resp. spôsobujú nekompletné interakcie s inými proteínmi TS. To môže viesť k dysfunkcii TS, zmenám permeability endotelu a paracelulárneho transportu a  následne vzniku aterosklerotického plaku. K rizikovým faktorom aterosklerózy patrí aj bakteriálna infekcia a zápal. Preto sme v našej práci študovali vplyv Ω-3 MK na expresiu okludínu v aorte endotoxemického potkana. Experimenty boli uskutočňované na dospelých normotenzných samcoch potkana kmeňa Wistar. V 10 dní trvajúcom pokuse sme u potkanov vyvolali zápalový proces jednorázovou dávkou bakteriálneho lipopolysacharidu (LPS) ( E. coli; 1 mg/kg i.p.). Následne bola týmto potkanom podávaná strava obohatená o Ω-3 MK (30 mg/kg/deň) po dobu 10 dní. Rovnakou diétou boli kŕmené aj zdravé zvieratá. Po skončení pokusu sme v tkanive odobratej aorty skúmali expresiu okludínu metódou Western blot a jeho distribúciu využitím imunofluorescencie. V elektrónovom mikroskope sme sledovali ultraštruktúru TS endotelu aorty zdravého a endotoxemického potkana. V plazme sme merali hladinu zápalového markera CRP. V zápalovej skupine sme zistili signifikantne zvýšenú koncentráciu CRP. LPS vyvolal štatisticky významnú redukciu expresie okludínu oproti zdravým zvieratám. Znížená bola aj jeho imunofluorescenčná distribúcia na endotlovej monovrstve. Elektrónovou mikroskopiou sme pozorovali LPS vyvolané subcelulárne zmeny TS – ich nepravidelné rozšírenie. 10-dňová diéta Ω-3 MK čiastočne redukovala hladinu CRP v plazme, avšak neovplyvnila expresiu okludínu v zápalovej skupine. Naše výsledky poukazujú na poškodenie integrity endotelovej monovrstvy vyvolané jednorazovou aplikáciou LPS. Krátkodobé (10 dňové) podávanie Ω-3 MK neovplyvnilo expresiu okludínu TS endotelu, ale malo čiastočné protektívne protizápalové účinky.

Poďakovanie: 

Podporené projektom VEGA 2/0065/13.

Zdroje: 

Diskusia

Ahoj Jakub, chcem sa spytat podla coho ste stanovili davku a dobu podavania omega 3 MK, a ci ste neuvazovali o zvyseni davky alebo o predlzeni ich podavania. Dakujem

Ahoj Mati, dakujem za otazku. Omega-3 MK, ktore sme podavali v našom pokuse su komerčne dostupny pripravok. Podla odporucania sme prepocitali davku vhodnu pre potkana a podavali sme este o cosi vyssiu davku. Tato davka mala fyziologicky ucinok v nasich predoslych pokusoch s konexinmi. Dlzka podavania MK by mala predstavovat akutne podavanie, pretoze je zname, ze dlhodobe (pravidelne) podavanie ma vseobecne-zdraviu prospesne ucinky.

Ahoj Kubo, v prvom rade ti chcem pochváliť pekné imunofluorescenčné obrázky a zaujímavú prácu. Chcem sa ťa opýtať, akým spôsobom ste zabezpečili, že každý potkan dostal stanovené množstvo omega-3 PUFA v priebehu jedného dňa? Nemali ste problém s tým, že by potkany nechceli prijímať vami podávané omega-3 PUFA? Ešte by ma zaujímalo, pri akom zväčšení sú robené tieto imunofluorescenčné snímky? Ďakujem :)